2010版中國藥典培訓(xùn)回答（第1部分：培養(yǎng)基配制）

廣東省藥檢所對《中國藥典》2010版微生物專題培訓(xùn)班的有關(guān)問題解答答案。
http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120415/3980531/
 
1.含瓊脂培養(yǎng)基冷卻至25℃后已凝固，如何測定其pH？
答：有專門的固體培養(yǎng)基pH計，如Radiometer A /S, DK22400 Copen2 hagen NV, Denmark 或者Microelectrodes Inc1, NH 03053,U1S1A1 。".
廈門敏測實驗器材公司提示：有專業(yè)的固體培養(yǎng)基PH計：
固體培養(yǎng)基PH計產(chǎn)品請來電咨詢。
 
2..PH計測培養(yǎng)基的PH好像有比較大的差別，應(yīng)如何選擇PH計？（效價7.8的培養(yǎng)基我用普通理化室的PH計測定只有7.0左右，不知道是否因為在高溫下測定（含瓊脂）
答：培養(yǎng)基應(yīng)冷卻到20℃～25℃才可測量，另外PH計應(yīng)按時校準。
 
3.生物指示劑對滅菌設(shè)備的性能，滅菌程序的驗證是只驗證一次呢，而后進行定期驗證，如果生物指示劑換批號，是否要重新驗證？
答：應(yīng)定期或不定期驗證一次，確保滅菌設(shè)備正常。生物指示劑更換批號，不需重新驗證。
 
4..紫外線滅菌后，需要多久進去操作？
答：打開通風凈化設(shè)備，半小時后可入內(nèi)操作。
 
5.孟加拉培養(yǎng)基是否可以取代玫瑰紅鈉瓊脂進行培養(yǎng)霉菌和酵母菌？
答：根據(jù)中國藥典，采用玫瑰紅鈉瓊脂。
 
6.配制PH值7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液時有時因為高壓滅菌器滅菌過程溫度過高而導(dǎo)致培養(yǎng)基混濁了，這種情況緩沖液還能用嗎？
答：建議按正常溫度滅菌，混濁培養(yǎng)基建議不要使用。
 
7.培養(yǎng)基在冷藏中形成結(jié)晶怎么處理？①銷毀 ②加熱再用 ③待冷卻完用。
答：建議不要使用
 
8.融化的培養(yǎng)基為什么不能再冷水中冷卻？
答：防止受熱不均引起結(jié)塊
 
9.取菌后測PH：（25℃）培養(yǎng)基配制好測PH，取其中一瓶測PH，那這一瓶測完就不能用了，污染了。
答：也可在無菌條件下取出適量測pH.
 
10.配制分裝過程中能否使用不銹鋼鍋？
答：我實驗室使用不銹鋼鍋，目前未發(fā)現(xiàn)異常。
 
11. 對新購進無菌0.9%氯化鈉（500ml）能否再次滅菌？
答：能。但包裝完好，購入時間較短的無需滅菌。
 
12.“要定期對壓力表進行檢定（消毒鍋），檢定周期一般為半年”，這句話怎樣理解，是廠家應(yīng)半年自己檢一次，還是有計量部門執(zhí)行？
答：由計量部門計量，計量后應(yīng)發(fā)有檢定證書。
 
13. 滅菌后，滅菌鍋需自然冷卻降壓才可以打開，這段時間是否會造成過度滅菌。
答：自然冷卻過程已經(jīng)計算在正常滅菌時間內(nèi)了，不會造成過度滅菌。
 
14. 培養(yǎng)基常規(guī)質(zhì)控有無強制檢定項目？目前我們所做項目有：ph、無菌檢查、生長檢查、是否符合藥典規(guī)定？
答：培養(yǎng)基應(yīng)按2010版藥典檢查。
 
15. 培養(yǎng)基所用器具若使用濕熱滅菌，是否必須待干燥后才可以使用？若烘干或其它方法，中間過程怎樣防止微生物污染？
答：如果是馬上使用且不是用于非水溶性供試液的制備及實驗，不一定要烘干；否則，應(yīng)干燥后使用，滅菌及干燥盡量在同一鍋里進行，或用紗布和牛皮紙包扎緊密。
 
16. 培養(yǎng)基的避光儲存，是否配置好的培養(yǎng)基其全部放避光儲存？
答：最好都避光保存。無條件時，光敏感的培養(yǎng)基一定要。
 
17. 商品培養(yǎng)基干粉說是加蒸餾水溶解，實際操作是否可以用純化水或注射用水？
答：只要不含有任何可能抑制或影響微生物生長的物質(zhì)的水均可。
 
18. 滅菌后的培養(yǎng)基是否都要測ph值？如何測定ph值？
答：每個制備批次的培養(yǎng)基都應(yīng)測定ph，可采用ph試紙或ph計測量。
廈門敏測實驗器材公司提示： 有專業(yè)的固體培養(yǎng)基專業(yè)PH計 
固體培養(yǎng)基PH計產(chǎn)品 
 
19. 培養(yǎng)基及器具滅菌可否同一設(shè)備同滅菌時間進行滅菌？
答：最好分開滅菌，條件不允許時可同爐滅菌，前提是都是潔凈無污染的。
 
20. 培養(yǎng)基的保溫能否用60℃的培養(yǎng)箱，它與45℃—55℃水浴鍋保溫方法有何不同？
答：不建議，因為溫度不同，長時間高溫影響培養(yǎng)基質(zhì)量。
 
21. 培養(yǎng)基的貯存是否需要放置于2—10℃冰箱內(nèi)？
答：需冷藏保存的培養(yǎng)基外包裝上會寫明。
 
22. 培養(yǎng)基滅菌后成份會有所蒸發(fā)減少，如何處理這個問題？
答：正常情況下蒸發(fā)量較少，可忽略不計。
 
23. 培養(yǎng)基融化后出現(xiàn)渾濁是有哪些方面的原因引起的？應(yīng)如何避免？
答：可能的情況有1培養(yǎng)基配置用水不符合規(guī)定；2滅菌過程溫度升溫慢或降溫慢；3培養(yǎng)基儲存不當；4融化時沸騰時間較長等。
 
24. 準備好的培養(yǎng)基有效期如何驗證？
答：定期取出培養(yǎng)基驗證其無菌性，促生長能力等方面。
 
25. 某些培養(yǎng)基無pH變化范圍，應(yīng)該怎么確定該培養(yǎng)基的pH范圍呢？
答：向培養(yǎng)基供應(yīng)商索取。
 
26. 用于環(huán)境監(jiān)控的培養(yǎng)基預(yù)培養(yǎng)時間如何確定？
答：與正常實驗的培養(yǎng)時間應(yīng)一樣。
 
27. 培養(yǎng)基加熱的溫度一般超過100℃，是否符合要求？有無時間限制？
答：是指哪個環(huán)節(jié)？培養(yǎng)基滅菌溫度規(guī)定是超過100℃，有具體的時間要求，如果是指固體培養(yǎng)基使用前的加熱熔化，則完全融化即可，避免長時間高溫加熱。
 
28. "培養(yǎng)基瓶的裝量,例：瓶裝量是500ml/瓶，裝量超過500ml/每瓶是否可行？
答：培養(yǎng)基的分裝量不得超過容器的2/3。"
 
29. 同一批培養(yǎng)基代表同一批號生產(chǎn)的培養(yǎng)基嗎？
答：是。
 
30. 培養(yǎng)基配制好滅菌后，在高壓容器中保溫降至50℃左右，可不可行？
答：建議最好不要，避免過度受熱。
 
31. 脫水培養(yǎng)基對濕度是否有要求？多少適宜？
答：按要求陰涼干燥環(huán)境儲存即可。
 
32. 對照培養(yǎng)基何時能購買？
答：已經(jīng)陸續(xù)開始銷售。
 
33. 培養(yǎng)基pH值測定溫度在25℃，這個溫度應(yīng)怎么控制？比如固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基使用過程中還能調(diào)節(jié)pH值嗎？
答：可水浴控制培養(yǎng)基溫度。
 
34. 配制培養(yǎng)基過程中，按說明書稱定量，加規(guī)定的純化水，煮沸溶解，為了避免煮沸過程總減少水分，是否要在配制過程適當增加水?比如配硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基.
答：可適量增加，自己掌握。
 
35. 商品培養(yǎng)基可否按照使用者驗證的參數(shù)滅菌？
答：理論上可以，請自行掌握。
 
36. 商品培養(yǎng)基一定要當天配當天用嗎？可否在一周內(nèi)用完？
答：不是即配即用的培養(yǎng)基的話，儲存得當，可以使用。
 
37. 稱量培養(yǎng)基時，注意不要吸入粉末，這粉末是指何物？
答：就是你所稱量的干粉培養(yǎng)基
廈門敏測實驗器材有限公司提醒：部分培養(yǎng)基成分含有毒性，稱量干粉培養(yǎng)基請佩戴防塵口罩，或購買顆粒劑培養(yǎng)基，減少吸入粉末。
 
38. 從中檢所購買的培養(yǎng)基還需要做適用性檢查嗎？
答：因為也是大批量生產(chǎn)的商業(yè)化培養(yǎng)基，應(yīng)該做適用性檢查。
 
39. 若商品化的脫水培養(yǎng)基說明書上的處方與藥典上的標示的處方不符的，不能用嗎？
答：不能。
 
10. 用于調(diào)pH值用的酸、堿溶液經(jīng)滅菌后會對Hcl溶液，NaOH溶液發(fā)生物理、化學(xué)變化嗎？如果有變化影響，會影響到所調(diào)培養(yǎng)基的質(zhì)量嗎？
答：理論上會，但未經(jīng)試驗證實。
 
41. 如果購買的預(yù)灌裝培養(yǎng)基，是否需要做培養(yǎng)基靈敏度？答：需要。
 
42. 購買回來的培養(yǎng)基有幾個批號，那么適用性檢查是只需做一次？還是每個批號都需做?
答：每批都需做
 
43. 如果不同次買回來的培養(yǎng)基是同一批號，是否后面買回來的培養(yǎng)基不需要做適用性檢查?
答：最好做
 
44. 如果配制和滅菌過程沒有驗證，是否每一次配制培養(yǎng)基均應(yīng)進行適用性檢查？
答：是。
 
45. 生物指示劑菌片濃度液如何進行復(fù)核？才可確認所購買生物指示劑菌片濃度符合要求.
答：我所未使用該產(chǎn)品，無此方面經(jīng)驗。
 
46. 紫外燈的使用期限，怎么規(guī)定，通常多長時間更換紫外燈？
答：每種型號的使用壽命不相同，有1000小時、1500小時、2000小時等，買來時應(yīng)仔細閱讀說明書。
廈門敏測實驗器材有限公司提醒：有殺菌燈紫外照度計儀可以檢測殺菌紫外燈的紫外強度。
紫外強度計儀器請來電咨詢
 
47. 培養(yǎng)基滅菌，若規(guī)定為121℃15分鐘，實際操作為（121 2）℃，（15 3）分鐘，這樣可取嗎？是否只能按照培養(yǎng)基配制121℃15分鐘說明來配制？
答：建議按照規(guī)定時間進行滅菌。
 
48. 培養(yǎng)基的滅菌程序如何驗證？
答：可采用生物指示劑進行驗證。
廈門敏測實驗器材有限公司提示：3M蒸汽滅菌生物指示劑產(chǎn)品貨號3M1262
 
49. 煮培養(yǎng)基，用不銹鋼鍋在電磁爐上煮可行？硫乙醇培養(yǎng)基是否要煮沸？如何煮沸？用不銹鋼鍋在電磁爐上煮沸可行嗎？可不可以水浴煮沸呢？
答：硫乙醇應(yīng)煮沸，量大時，我實驗室用不銹鋼鍋在電磁爐上煮沸。
 
50. 從中檢所購買的培養(yǎng)基還需要做適用性檢查嗎？
答：因為也是大批量生產(chǎn)的商業(yè)化培養(yǎng)基，必須做。
 
51. 在滅菌條的效力驗證時選取微生物指示劑，由于我公司產(chǎn)品品種多，同一種微生物指示劑又存在著在不同介質(zhì)中耐熱性（D值）不同，那應(yīng)如何測定某微生物指示劑在某一介質(zhì)耐熱性（D值）呢？應(yīng)如何選取最適宜的微生物指示劑呢？
答：選擇生物指示劑，應(yīng)以所選用的滅菌方法向?qū)?yīng)。
 
58. 各種成品培養(yǎng)基要求的滅菌溫度與時間不一樣，做滅菌鍋的驗證應(yīng)該如何確定溫度和時間？
答：我們未遇此種情況，但認為應(yīng)按照最低溫度和最短時間進行驗證。
 
52. 瓊脂平板最好現(xiàn)配現(xiàn)用，但現(xiàn)有規(guī)定要求培養(yǎng)基需要經(jīng)適用性檢查后才可使用，時間上的沖突如何解決？
答：一個批次的培養(yǎng)基做一次適用性檢查即可，以后再使用時可現(xiàn)配現(xiàn)用。
 
53. 培養(yǎng)基（微生物限度用）是否需作無菌性檢查？若培養(yǎng)基還需作陽性生長試驗，那么無菌檢查與陽性檢查是否應(yīng)分區(qū)域進行？
答：按藥典規(guī)定進行驗證。陽性應(yīng)在專門區(qū)域內(nèi)進行。
 
54. 是不是有一種1ml的沙土培養(yǎng)管（用來傳代接種），在哪里可以買到？
答：我們未用過，不清楚如何購買。
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55. 固體培養(yǎng)基能存多久？（已滅菌的）融化的培養(yǎng)基在水浴中不超8小時，而它呢？
答：視培養(yǎng)基種類而定，不可一概而論。
 
56. 可否使用紫外線強度指示卡來檢測紫外燈是否需要更換？
答：我們未用過紫外線強度指示卡，我們了解有一種紫外線強度檢測儀大概可以滿足你們的要求。
廈門敏測實驗器材有限公司提示：有專測紫外線強度檢測儀器
 
57. 如培養(yǎng)基在高壓滅菌器中溫度需自然下降20度才開蓋嗎？
答：高溫滅菌器有安全閥，溫度下降到安全閥可打開時將培養(yǎng)基取出室溫冷卻，各型號滅菌器安全開蓋溫度不盡相同。
 
58. 稀釋液滅菌后ph值是否有變化？有何影響？（如ph7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液，ph6.8無菌磷酸鹽緩沖液）
答：一般pH有下降現(xiàn)象，約0.2左右，不同培養(yǎng)基pH變化可能不同。
 
59. 省所能否幫企業(yè)代購“對照培養(yǎng)基”？如能，如何聯(lián)系？
 
60. 對照培養(yǎng)基在省所可以買到嗎？
答：中檢所已經(jīng)陸續(xù)開售，請與我所業(yè)務(wù)科直接聯(lián)系（020-81854392）。
 
61. 按要求每批培養(yǎng)基要做系統(tǒng)適用性驗證，下面分所或廠家如直接從省所購買，省所買回來的時候肯定每批已已驗證了，那下面分所還要做驗證的話，那不就大大的浪費人力、財力、物力。可否省所購進的不驗證或提供驗證報告？
答：各實驗室配制培養(yǎng)基的程序不同，必須自己做驗證。
 
62. 有些培養(yǎng)基要用到梭菌等，下面所可能一兩年也沒檢測陰道內(nèi)用藥，也很少用到這個菌，按驗證要求，就得把各種菌買回去，還得花很多時間去維護、保管、傳代等，下面有些藥廠這方面的人才就更加稀缺，這就逼得很多廠家為了應(yīng)付檢查做更多的假記錄或買N支菌回來這只是為了應(yīng)付檢查。答：這種情況我們能理解，但是還請按照藥典規(guī)定處理吧。
 
63. 配好的MUG有沒有要求多長時間內(nèi)要使用完？可以一次過配很多，用上幾個星期？
答：請按藥典中對培養(yǎng)基的一般要求操作。
 
64. 配好的靛基質(zhì)有沒有要求多長時間內(nèi)要使用完？可以一次過配很多，用上幾個星期？
答：請放冰箱保存，我們的經(jīng)驗可使用一到兩個月。
 
65. 對照培養(yǎng)基中檢所還是沒有賣，在10月1日未買到對照培養(yǎng)基之前，可否沿用05版藥典來確認培養(yǎng)基適用性？
答：在未買到之前，請盡量購買有資質(zhì)的品牌培養(yǎng)基。盡快按10版執(zhí)行。
 
66. 大腸埃希菌檢查時，MUG培養(yǎng)基必須在5小時和24小時，兩個時間段做觀察？還是選其中一個適應(yīng)的時間點作觀察好？
答：如5小時可以明顯觀察到結(jié)果，就可做進一步檢查。
 
67. 我公司是生產(chǎn)大容量注射液的，由于國家對滅菌效力F0值的要求不斷提高，結(jié)合我公司現(xiàn)行滅菌條件所達到的F0值不高，故必須進行滅菌工藝變更，在滅菌工藝變更中，需做滅菌效力驗證，需選取適宜的微生物指示劑。但由于我公司品種較多，同一微生物指示劑在不同品種藥液中會有不同的耐熱性（D值），這影響到我公司對微生物指示劑的選取，請問國內(nèi)對耐熱性較高的微生物指示劑的耐熱性測定是怎樣的辦法？
 
答：我們未做過此類研究，請咨詢相關(guān)產(chǎn)品公司。
 
以上內(nèi)容來源網(wǎng)絡(luò)，因2015年藥典已推出，部分內(nèi)容有變更，實際以2015年藥典為準，或咨詢相關(guān)專業(yè)人員，以上內(nèi)容僅供參考。